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裂解方法的评价： 含蛋白酶的裂解方法，可以认为是抽提基因组 DNA 的选择。裂解包括膜蛋白的游离和与基因组 DNA 相连接的蛋白质的游离。蛋白酶的作用是使蛋白质变小，故而对蛋白质的游离有巨大的促进作用；同时，巨大的基因组DNA 是很容易“缠”住大分子的东西的，蛋白质被蛋白酶消化变小后，则不容易被基因组 DNA “缠”住，有利于蛋白质在纯化操作中的去除，使好终获得的基因组 DNA 的纯度更高。另外一个思路是，如果基因组 DNA 与蛋白质 “缠”在一起，在纯化的过程中有两种可能：如果基因组 DNA 的特性占优势，则纯化时以 DNA 的形式被保留下来，导致蛋白质的残留；如果蛋白质的特性占优势，则纯化时以蛋白质的形式被去除，导致 DNA 的损失。当然去污剂裂解方法，仍然在细胞基因组 DNA 抽提方面有优势，尤其是当得率和纯度要求不是好高，而经济性及操作简单很重要时。控制好裂解液/样品的比例是该方法成功的关键。该方法结合高盐沉淀，可以实现好简单的操作，但纯度及得率的稳定性可能会比用PC抽提的差一些。核酸提取保证核酸一级结构的完整性。长沙全血核酸提取推荐

PC抽提的关键是，一要混匀彻底，二要用量足够。彻底混匀，才能确保苯酚与蛋白质的充分接触，使蛋白质完全变性。许多人总是担心混匀的剧烈程度是否会对核酸，尤其是基因组 DNA 造成破坏，实际上大可不必如此小心。剧烈的混匀操作，是会部分打断大分子的基因组 DNA，但该破坏作用不会强烈到 DNA变成 10kb 以内的小片段。手剧烈晃动混匀后，基因组 DNA 的片段，大部分会大于 20kb，这个大小，除了一些特别的要求外，对 PCR和酶切，都是完全适用的。自动核算提取设备厂家核酸提取仪可使用各种磁珠法提取试剂。

经典的核酸提取方法通常是加去污剂（SDS 等）裂解细胞，经蛋白酶处理、有机溶剂 提取及乙醇沉淀等步骤。 由于样本的处理及保存对 DNA 和 RNA（尤其是 RNA）的影响较大，因此在核酸测定 时标本的处理及适当保存对测定结果的准确有效非常重要。 临床常见的标本有血清（浆）、全血、分泌物、棉拭子、脓液、体液、新鲜组织、石蜡 切片等，这些临床标本的处理和保存方法各有不同。 临床标本的处理 血清（浆）标本 _x000c_一些病原体，如乙肝细菌（HBV）、丙肝细菌（HCV）、人类免疫缺陷细菌（HIV） 等的 PCR 检测常采用血清或血浆标本。

介质可以分为两大类，一类是柱式的，即介质被预先装填在下面是通的柱子里；另外一类则是颗粒状(如Glassmilk、磁性小珠等)。颗粒状的介质的纯化操作与经典的醇沉淀差别不大，都是通过数次的加液-倒液过程，干燥后，溶解即可获得纯化好的核酸。柱式纯化的操作虽然也是有加液-倒液过程，但因为加入的液体通过离心后会进入另外一个离心管中，与含有核酸的柱子完全是分开的，所以洗涤更彻底，操作更省力 (不用操心将核酸倒掉了，或者液体的残留)。不过，介质纯化方法的成本是好高的。核酸提取方法已经成为了 RNA 抽提的主流。

核酸提取纯化原则和要求 1.保证核酸一级结构的完整性 2.排除其它分子的污染（如提取DNA时排除RNA的干扰） 3.核酸样品中不应存在对酶有压抑作用的有机溶剂和高浓度的金属离子 4.尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质核酸提取纯化方法 酚/氯仿抽提法 1956年发明，通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后，在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分，在有机相中主要是脂类物质，蛋白质位于两相之间。 醇沉淀法 乙醇能够消除核酸的水化层，使带负电荷的磷酸基团暴露出来，NA﹢等带正电荷离子能与磷酸基团结合，形成沉淀。核酸提取简化步骤，缩短提取时间。广州自动核算提取设备生产厂家

核酸提取裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程。长沙全血核酸提取推荐

纯化方法 评价 PC 抽提/醇沉淀方法，是一个**过时的方法。稳定、可靠、经济、方便。PC抽提可以彻底去除蛋白质，醇沉淀可以去除盐，对于一般的干净的样品 (杂质为蛋白质)，该方法完全可以获得高质量的核酸。虽然每次 PC抽提都会损失一部分核酸(因为不可能将水相全部移取)，以及低浓度核酸的醇沉淀效率低，但这些问题都可以靠操作的调整而得以解决或者减少影响。该方法的好大的问题是不适合大规模抽提。 PC抽提是去除蛋白质的一个非常有效的手段。苯酚能使蛋白质变性，变性后的蛋白质从水相中被析出，处于苯酚中或者苯酚/水相之间。长沙全血核酸提取推荐

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