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RIPA细胞裂解液
产品详情:
RIPA裂解液是**可靠的缓冲液之一,其主要成分含1% NP-40, 0.5% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,该缓冲液能够从细胞质,膜和**白质中提取蛋白质,并且与许 多应用相容,包括蛋白质分析,和蛋白质纯化。RIPA缓冲液不含蛋白酶或磷酸酶,如果需要,可将酶添加到试剂中以防止蛋白质水解并维持蛋白质 的磷酸化状态。一些蛋白激酶和其他酶可能对RIPA缓冲液的组分敏感,导致其活性降低。 在这种情况下,准备不含脱氧胆酸钠和SDS的RIPA缓冲液。
注意事项:
1.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
2.裂解得到的蛋白样品,含有较高浓度的去垢剂,不建议用Bradford 法测定蛋白浓度,可以选用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
3.裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NFKB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。 细胞增殖是生物体的重要生命特征。长沙pcr检测细胞增殖检测服务
总RNA提取试剂盒
Trizol是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围较大,可以从动物单位、 植物材料、 各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。 该方法对少量的单位(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的单位(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在Trizol中被充分裂解的同时能够比较大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA 分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern blot、Dot Blot、体外翻译等。
Trizol 试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb(28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。(注意如果是普通琼脂糖凝胶电泳,28S的位置大约在2kb,18S大约在1kb的位置,不同浓度的凝胶位置变化较大。)
沈阳pcr检测细胞增殖检测服务CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。
并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉***影响。当然***影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入***后的空白吸收即可。三、CCK8检测细胞增殖/毒性的注意事项当使用标准96孔板时,贴壁细胞的**小接种量至少为1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μl培养基)。酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。当在培养箱内培养时,培养板**外一圈的孔**容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差。一般情况下,**外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用。在培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验时,还应考虑***的吸收,可在加入***的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450nm的吸光度作为空白对照。金属对CCK-8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、***铜会***5%、15%、90%的显色反应,使灵敏度降级。
抗体稀释参考
一抗稀释范围为1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事项 1.使用该产品比使用沉淀比色HRP底物检测所需的抗体浓度低。为优化抗体浓度,请进行一次系统的点印迹分析;
2. 工作液在室温下8小时内可以保持稳定,但是应该避免暴露在阳光下或任何其他强光环境,然而短期实验室照明强度不会破坏工作液的稳定性;
3. 封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应,导致出现非特异性信号。封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性,当从一种底物转换为另一种底物时,有时会出现信号衰减或背景增加的现象,原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统;
4. 使用亲和素/生物素检测系统时,避免使用牛奶作为封闭试剂,因为牛奶中含有不定量的内源性生物素,会导致高背景信号;
5. 保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积,以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖,避免膜变干。增大封闭缓冲液及洗涤缓冲液的使用量可以降低非特异性的信号;
标签抗体
Anti His-Tag Mouse mAb
1.产品简介
特异性针对6 × His标签的单抗可较大提高一些免疫检测实验的效率,帮助研究者鉴定、检测和纯化细菌、昆虫细胞和哺乳动物细胞中的多组氨酸融合蛋白。本Anti His-tag mouse mAb可识别融合蛋白N端、C端和内部区域的His标签。
2.产品特点
▪性价比高,多种稀释比例推荐:
WB: 1:1000 - 1:10000
IP: 1:100 - 1:500
IF: 1:200 - 1:1000
▪常备现货
3.结果示例
His标签小鼠单抗(5B8)经1:2000 (泳道1)和1:5000 (泳道2)
稀释后对His标签融合蛋白进行Western Blot分析。
细胞增殖具体是指什么?长沙cck8细胞增殖试剂盒
CCK对细胞几乎无伤害,不伤害细胞,细胞可重复利用。长沙pcr检测细胞增殖检测服务
抗体稀释参考
一抗稀释范围为1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事项
1. 为获得比较好效果,在孵育步骤请使用摇床;
2. 将Tween20(终浓度0.05-0.1%)加入封闭缓冲液和稀释的抗体溶液,以降低非特异信号;
3. 不要使用叠氮钠作为缓冲液的防腐剂,叠氨钠是HRP的***物;
4. 避免手与膜直接接触,实验过程应戴手套或使用干净的镊子;
5. 所有设备必须清洁且不沾染外来物质,金属器械(如剪刀)不得具有可见的锈迹,锈迹可能导致斑点形成和高背景。
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上海儒安生物科技有限公司是一家从事生物技术、物联网技术、网络技术领域内的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,软件开发,电子商务(不得从事增值电信、金融业务),化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)、实验窒设备的销售。的公司,致力于成为客户业务创新、医药、保养可信赖的合作伙伴。公司自2016-09-20成立以来,投身于[ "细胞转染试剂", "ecl发光液", "cck8细胞增殖", "内参抗体" ],是医药、保养的主力军。公司拥有多年的行业经验,每年以销售收入达到300-500万元,如果您想了解更多产品信息,请通过页面上的电话联系我们。上海儒安生物科技创始人李红振,始终关注客户,以优化创新的科技,竭诚为客户提供比较好的服务。